A biológiai specifikáció folyamatában egy faj két populációja földrajzilag izolált (gyakran fizikai gáton, például folyó vagy hegység mellett). Az idő múlásával ez a két populáció genetikailag eltér, és alkalmazkodik az adott környezetükhöz,
Amíg annyira megkülönböztetik, hogy már nem tudnak átjutni. Ezen a ponton külön fajnak tekintik őket.
A testvérfajok gyakran nagyon hasonlóak egymáshoz, de megkülönböztethetők kis genetikai különbségek vagy ökológiai/viselkedési tulajdonságok alapján. Bizonyos esetekben a testvérfajok akár ugyanabban a földrajzi területen is élhetnek, és a párzási preferenciák vagy az időzítés különbségei miatt nem tudnak átkarolni.
A testvérfajok jelenléte emlékeztető arra, hogy a specifikáció folyamatban lévő folyamat, és hogy még szorosan rokon fajok is tovább fejlődhetnek és eltérhetnek az idő múlásával. A testvérfajok tanulmányozása segíthet a tudósoknak megérteni, hogy az evolúciós folyamatok hogyan alakították a földi élet biodiverzitását.