Az oposzumok évente többször szaporodnak, a nőstények évente legfeljebb háromszor szülnek, legfeljebb 13 kölyökkel. A terhesség csak 12–13 nap.
Születéskor az oposzumok hihetetlen kicsik – mindegyik csak ~56 grammos –, rose, haja nélkül és vakságban. Az anya a haszsákjába helyezi őket, ahol kb. két hónapig fejlőnek tovább. Az első 50–60 nap a haszsákban élnek és szoptatnak. 4 hetes kora mögött kinyílnak a szemeik és fülleik, a testüket szőr borítja.
60–90 nap után elkezdnek kijönni és az anya hátán utaznak még 2–3 hónapig. ~100 nap után szőkezésre kerülnek, és az anyjukkal maradnak, amíg az nem szül újra – ekkor ~10 hónaposak, és önmagukért tudnak intézkedni.
Az oposzumok magas csecsemő-elhullás árral küzdenek – kb. 50% –, ezért a több nagy vetés biztosítja a faj fennmaradását.