Ha most sok medúza Glo fehérjét akarunk előállítani, mi van az első sikeres clonig elérése után?

A sikeres klónozás után nagy mennyiségű medúza fényfehérje hatékony elérése érdekében itt van a megtett lépések általános körvonala:

1. Méretezési sejttenyészet:

- Kezdje a sikeresen klónozott sejtekkel, amelyek expresszálják a medúza fényfehérjét.

- Használjon megfelelő táptalajt és optimalizált feltételeket a sejttenyésztőkben, lombikokban vagy más megfelelő edényekben.

2. A növekedési paraméterek optimalizálása:

- A fehérje expressziójának fokozása érdekében figyelje és optimalizálja a sejtek növekedési körülményeit, ideértve a tápanyag -ellátást, a hőmérsékletet, a pH -t és az oxigénszintet.

3. Fehérje expressziója és tisztítása:

- indukálja a fehérje expresszióját megfelelő ingerek, például specifikus vegyi anyagok vagy tenyésztési körülmények felhasználásával.

- Betérje meg a sejteket, miután elérik a kívánt expressziós szintet.

- Lyse a sejteket, hogy felszabadítsa a medúza fényfehérjét.

- Tisztítsa meg a fehérjét olyan technikákkal, mint a kromatográfiás vagy a szűrés.

4. Minőségellenőrzés és elemzés:

- Elemezze a tisztított fehérje tisztaságát, aktivitását és koncentrációját annak minőségének biztosítása érdekében.

- Végezzen vizsgálatokat vagy kísérleteket annak megerősítésére, hogy a fehérje megtartja funkcionalitását és a kívánt tulajdonságokat.

5. Tárolás és megőrzés:

- A tisztított medúza ragyogó fehérje megfelelően tárolható, például alacsony hőmérsékleten vagy a megfelelő pufferekben, hogy megőrizze stabilitását és funkcionalitását az idő múlásával.

6. Kutatás és alkalmazások:

- Végezzen kutatást és fedezze fel a medúza fényfehérje lehetséges alkalmazásait, például a biolumineszcens képalkotásban, a bioszenzorokban vagy más biotechnológiai alkalmazásokban történő felhasználásában.

7. Méretezési termelés:

- Miután a termelési folyamatot optimalizálták, méretezze tovább, hogy megfeleljen a medúza fényfehérje iránti igénynek. Ez magában foglalhatja a nagyobb bioreaktor rendszerek létrehozását vagy az ipari termelési protokollok optimalizálását.

8. Szabályozási szempontok:

- A régióban a kívánt felhasználástól és szabályozásától függően szükség lehet a szabályozási jóváhagyások megszerzésére vagy a medúza fényfehérje előállítására és eloszlására vonatkozó konkrét minőségi és biztonsági előírások betartására.