A préri kutyáknak sok ellensége van, mind ragadozók, mind versenytársak:
Ragadozók:
Emlősök:
* Kojotok: Ezek a préri kutyák leggyakoribb ragadozói.
* Törpék: A törpék jártasak az ásásban, és betörhetnek a préri kutya barlangokba.
* Fekete lábu fermák: Ezek a veszélyeztetett állatok majdnem kizárólag préri kutyákra támaszkodnak ételként.
* Rókák: Mind a vörös, mind a kit róka vadászik préri kutyákra.
* Vadmacskák: A vadmacskák lehetőségvadászok, és elviszik préri kutyákat, ha elérhetők.
* Menyervek: A hosszú testű menyerek szembetűnő rugalmassággal vadásznak a préri kutya barlangokban.
* Vadkutyák: A vadkutyák fenyegethetik a préri kutya kolóniákat.
Madarak:
* Aranysasok: Nagy ragadozómadarak, ami felnőtt préri kutyákat is elkaphatnak.
* Érsekk: Vörösfarok érzsök és rozsdás érszak gyakori ragadozói a préri kutyáknak.
* Bagolyok: Nagy fülű bagolyak éjszakai ragadozók, akik préri kutyákat vadásznak.
Hüllők:
* Kígyók: Csíppenzős kígyók és más kígyók vadásznak préri kutyákra, különösen a fiatalokra.
Versenytársak:
* Egyéb préri kutya fajok: Különböző préri kutya fajok versenyezhetnek az erőforrásokért, különösen ha az elterjedésük átfedésben van.
* Szárnyas és egyéb háziállatok: A háziállatok legelhetnek a préri kutya élőhelyein, és versenyeznek az ételért.
* Barlangbagolyok: A barlangbagolyak gyakran a elhagyott préri kutya barlangokban fészekelnek, potenciálisan versenyre készen a térért.
Fontos megjegyezni, hogy a préri kutyák konkrét ragadozói és versenytársai változnak a földrajzi helyszíntől és az élőhelytől függően.