A pókok elsősorban ragadozó gerinctelenek, amelyek étrendje a fajta, a méret és az élőhely szerint változik.
Rovarok
A legtöbb pók rovarokat eszik: légyek, hangyák, bogarak, lepkek, pillangók, szöcske, tücsök. A hálóépítő fajok a repülő rovarokat fogják, a vadás pókok aktívan üldözik a prédát a talajon.
Más szúnyogcsoportok
Néhány pók szúnyogokat, tizenkilincsöket, skorpiókat, hamis skorpiókat és még más pókokat is predál.
Kis gerincesek
A nagyobb pókfajok alkalmanként fognak kis gerinceseket: gyíkök, béka, kis halak, kígyók, rágcsálók, az okay és a szál használatával.
Növényi anyag és vér
Ritkán néhány pók por, nektár vagy növényi nedvet fogyaszt. Néhány specializált faj, mint a vampírpók, gerincesek vérét eszik.
Ökológiai szerep
Lehetőség szerinti ragadozókként a pókok segítenek szabályozni a rovarpopulációkat és fenntartani az egyensúlyt az ökoszisztémákban világszerte.