A guppi termékenyítése belső.
A hím guppiknak módosult elemzőúszója van, gonopodium, amit a párosodáskor a nősténybe juttat a spermát. A gonopodium benyúlik a nőstény nemi nyílásába, és a spermát leadja. A nőstény guppi ezután tárolja a spermát a testében, amíg készen áll a tojások leadására (ovuláció).
A termékenyítés akkor következik be, ha a hím spermája belsőleg termékenyíti a nőstény tojásait. A termékenyített tojások a nőstényben fejlődnek, és végül élő kölykökként szabadulnak fel – ezt hívják élőszülésnek (viviparitásnak).