Colbert karrierje az 1990-es évek elején kezdődött, amikor a Second City improvizatív vígjátékcsoport tagja volt. Több televíziós műsorban is szerepelt, köztük a The Dana Carvey Show-ban és a Strangers with Candy-vel. 1999-ben megalkotta Stephen Colbert, egy konzervatív politikai kommentátor karakterét a Comedy Central The Daily Show című sorozatához. Colbert évekig játszotta a karaktert, és az Egyesült Államok egyik legnépszerűbb komikusává vált.
2005-ben Colbert elhagyta a The Daily Show-t, hogy létrehozza saját műsorát, a The Colbert Reportot. A műsor egy szatirikus hírműsor volt, amelyben Colbert egy öntörvényű, jobboldali szakértő szerepét játszotta. A show hatalmas sikert aratott, és számos díjat nyert, köztük többszörös Primetime Emmy- és Peabody-díjat.
2014-ben Colbert véget vetett a The Colbert Reportnak, hogy átvegye a The Late Show műsorvezetőjét Stephen Colberttel. A műsor egy hagyományos késő esti talk show, amelyben Colbert hírességekkel, politikusokkal és más vendégekkel interjút készít. A műsor sikeres volt, és számos díjat nyert, köztük többszörös Primetime Emmy-díjat és Peabody-díjat.
A televízióban végzett munkája mellett Colbert több könyvet is írt, köztük az I Am America (And So Can You!) és az America Again:Re-becoming the Greatness We Never Were. Több filmben is feltűnt, köztük az Anchorman 2:The Legend Continues és a Zoolander 2-ben.
Colbert tehetséges humorista, író és producer, aki jelentős hatást gyakorolt az amerikai kultúrára. Az Egyesült Államok egyik legnépszerűbb komikusa, munkásságát a kritikusok és a közönség egyaránt dicsérte.